HIV, PCR QUANTITATIVO + GENOTIPAGEM

SINONIMIA: HIV 1-PCR Quantitativo + Genotipagem; HIV 1 Carga Viral + Genotipagem; HIV 1 Load Viral para HIV + Resistência aos Anti-Virais;
HIV 1 Quantificação RNA Vira + Genotipagem; HIV-PCR Quantitativo + Resistência aos Anti-Virais;

METODO: Sequenciamento Genético do DNA (Genotipagem) + Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

MATERIAL: Sangue

CONDIÇÃO: Jejum Não Obrigatório.

INSTRUÇÕES: Para a realização deste exame é necessário seguir as instruções abaixo:
1- Este exame SOMENTE poderá ser realizado se o cliente possuir o Pedido Médico, não sendo possível o atendimento através do Auto Pedido.
2- O cliente deverá portar um documento de identificação com FOTO (Identidade, Carteira Profissional, Identidade Profissional, etc), o qual será devolvido após a conferência no ato da coleta do material.
3- O laudo com o resultado do exame SOMENTE poderá ser entregue ao próprio cliente. Se o cliente estiver impossibilitado de retirar o laudo, ele deverá AUTORIZAR a retirada por terceiros preenchendo e assinando o Termo de Autorização para Retirada de Laudos.

COLETA:
– Colher 3,0 mL de plasma (EDTA ou ACD).
– O sangue deve ser colhido em tubo vacutainer (tubo a vácuo – EDTA com gel saparador no mesmo tubo) ou seringa estéril com EDTA.
– Não abrir o tubo de coleta de sangue.

INSTRUÇÕES PARA SEPARAÇÃO DO MATERIAL E ENVIO PARA LAB. DE APOIO:
=> Amostra para PCR:
– O sangue deve ser colhido em tubo PPT-Vacutainer (EDTA com gel
separador no mesmo tubo) ou seringa estéril. Centrifugar a 1800 r.p.m., por 20 minutos. Aliquotar assepticamente 1,0 mL de Plasma em frasco estéril. – Congelar imediatamente e enviar no gelo.
– Enviar frasco estéril ou solicitar o kit para PCR.
– NÃO enviar em tubo tipo Eppendorf.
=> Amostra para GENOTIPAGEM:
– Separar em 2 frascos plásticos estéreis e congelar.
– Separar e congelar no máximo 4 horas apos a coleta.
– Anotar data da coleta e hora do congelamento nos frascos e na requisição.
– Enviar no mesmo dia da coleta.

CONSERVAÇÃO E ENVIO: O plasma pode ser mantido congelado até 2 meses de – 5 a – 25oC.

SETOR: SAL (Terceirização de Exames)

MARCAÇÃO: 12 dias úteis

REALIZAÇÃO: Hermes Pardini

APLICAÇÕES CLÍNICAS:
=> HIV PCR Quantitativo:
A quantificacao da carga viral pode ser utilizada com o objetivo de:
– Estabelecer o prognostico de um individuo (tempo de progressao para AIDS). Sabe-se que quanto maior o nivel do RNA do HIV, maior eh a
destruicao de celulas CD4.
– Determinar quando iniciar o tratamento. De acordo com CDC (Center of Disease Control/USA/2000): paciente sintomatico, contagem de CD4
< 200/mm3 e/ou carga viral > 30.000 (NASBA) ou > 55.000 (PCR) copias/ mL.
– Avaliar a eficacia das drogas anti-retrovirais. Mudanca de tratamento devera ser levado em conta se:
Nao ha queda de pelo menos 0,5 a 0,75 log na carga viral, apos um mes de tratamento.
Nao cai para niveis indetectaveis (< 50 copias/mL) em 4 a 6 meses.
Aumento da carga viral apos manter niveis indetectaveis sugerindo resistencia aos anti-retrovirais.
Queda continua do numero de linfocitos CD4 (> 25%).
Deterioracao clinica.
Observacoes:
1. Reducoes, aumentos ou oscilacoes entre dois resultados de exame decarga viral menores do que 0,5 log10 (~3 vezes) nao sao consideradas significativas do ponto de vista clinico.
2. Varios fatores podem influenciar a variacao do RNA do HIV do plasma. As mais comuns sao devido a ativacao do sistema imune (infeccoes intercorrentes ou imunizacoes).

=> HIV Genotipagem:
Detecta a presenca de mutacoes no gene pol. do HIV-1, que levam a resistencia as drogas utilizadas no tratamento da infeccao cronica, como os inibidores nucleosideos e nao nucleosideos da transcriptase reversa, e aos inibidores da protease.
Este teste esta indicado para:
. determinar a droga anti-retroiral de escolha quando o paciente apresenta falencia ao tratamento atual.
. avaliar o padrao do virus infectante na fase aguda da infeccao pelo HIV.
. avaliar o padrao de resistencia na mulher gravida.
Devido ao acumulo de dados relacionados a interpretacao dos testes de resistencia aos anti-retrovirais, sera

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